犬・猫の乳腺腫瘍では、これまでに組織グレードの評価法がいくつか提案されてきていますが、これらの多くはヒトの乳腺腫瘍の組織グレードで用いられるElston and Ellisのグレード法（管状構造形成の割合、核異型、核分裂指数）を基にしています。その中から、犬・猫に合わせて修正された、あるいは予後因子を基にした組織グレードの評価法をご紹介します。
　

Elston and Ellisの評価法を基にして、2013年にPeñaらによって犬の組織グレードの評価法が発表されました1)。これは、下記のA、B、Cの3項目について評価してポイント化し、最終的にA+B+Cの合計のスコアでグレードを決定します。
　
評価の基準

組織学的特徴	ポイント
A. 管状構造形成a 　　　（Tubular Formation）	1	管状構造の割合が＞75%
	2	管状構造の割合が10-75%
	3	管状構造の割合が＜10%（少量～みられない）
B. 核異型b 　　　（Nuclear Pleomorphism）	1	均一または通常の小型核、時折見られる核小体
	2	核の大きさや形に中等度のバリエーション、多染色体性の核、核小体の出現（いくつかは明瞭）
	3	核の大小不同が頻繁、多染色体性の核、しばしば1つ以上の明瞭な核小体
C. 核分裂指数（10視野）c 　　　（Mitoses per 10 HPF）	1	0-9個/高倍率10視野
	2	10-19個/高倍率10視野
	3	≧20個/高倍率10視野

a.複合型および混合型の腫瘍では、管状構造形成の割合は腺上皮細胞のエリアのみで評価する。悪性筋上皮腫の場合、管状構造形成はポイント2。数種混在している場合には、管状構造形成のスコアは最も代表的な悪性部で判定する。
b.複合型および混合型の腫瘍では、すべての悪性コンポーネントで核異型を評価する。
c.HPF: high power field （高倍率）。辺縁あるいは最も核分裂が盛んな部位（上皮だけに限らない）で評価を行う。1視野の直径 = 0.55mm
　
腫瘍の組織グレード

トータルのスコア（A + B + C）	グレード（悪性度）
3-5	I （低グレード、高分化型）
6-7	II （中グレード、中分化型）
8-9	III （高グレード、低分化型）

　

このPeñaらの報告では、この組織グレードを用いて、65頭の犬で2年間の予後のフォローアップを含めた前向き研究が行われています。各グレードの生存平均期間およびKaplan-Meierの生存曲線は以下に示す様に報告されています。
　

グレードI   すべての症例が検査終了時（38ヶ月以上）まで生存
グレードII  平均期間　32.84ヶ月
グレードIII  平均期間　20.36ヶ月

組織グレードと全生存期間の生存曲線（Peñaらの報告1）より抜粋）
　

このグレードと相関していた項目として、再発や転移の有無、腫瘍のサイズ（＜1, 1-2.9, および≧3cm）、組織学的なサブタイプ（2011年のGoldschmidtらの分類法に基づく）が挙げられています。比較的グレードの高い傾向にあった組織学的なタイプとしてはSolid carcinoma、comedocarcinoma、anaplastic carcionoma、adenosquamous carcinomaが含まれていますが、すべての組織学的タイプの評価はされておらず、また個々のタイプの数も十分ではないので、今後の検討が必要です。
　

猫でも、長らくヒトの乳腺腫瘍に用いられるElston and Ellisのグレード法を用いていましたが、近年、Millsらによって、より猫の乳腺腫瘍の予後を反映した組織グレードの評価法が提唱されました2)。この論文中では、従来のElston and Ellisのグレードを修正した評価法の他、予後と関連する組織学的な因子を基に評価を行う、新しい評価法も提唱されています。個々の評価項目の合計点でグレードを決定する方法は従来通りです。Elston and Ellisのグレードの修正法のうち、核分裂指数のみを変更したもの（Mitotic-Modified Elston and Ellis, MMEE）はA+B+Cの合計のポイント、リンパ管侵襲等を加えたもの（Revised Elson and Ellis, REE）はA+C+D+Eの合計のポイントでグレードを決定します。新しい評価法（novel grading system）は表2に示し、A+B+Cの合計のスコアでグレードを決定します。この3つの評価法は、いずれも従来用いられていたElston and Ellisの評価法に比べ、より猫の乳腺腫瘍の予後を反映していると報告しています。
　

表1 Elston and Ellis systemを修正した評価法
　
評価の基準

評価点	スコア
A. 管状構造形成 　　　（Tubular Formation）	1	管状構造の割合が＞75%
	2	管状構造の割合が10-75%
	3	管状構造の割合が＜10%（少量～みられない）
B. 核異型 　　　（Nuclear Pleomorphism）	1	均一または通常の小型核
	2	核の大型化、空胞化、バリエーションが中等度
	3	形状や大きさが著しく不均一、空胞化したクロマチン
C. 核分裂指数（10視野）a 　　　（Mitoses per 10 HPF）	1	0-50個/高倍率10視野
	2	51-70個/高倍率10視野
	3	≧71個/高倍率10視野
D. リンパ管侵襲	0	なし
	1	あり
E. 核形態（Nuclear form）b	1	≦5% が異常
	2	6-25% が異常
	3	＞25%　が異常

a.核分裂像が最も活発に見られた部位で、10の連続した視野（1視野は0.53mm, 対物レンズ40x）の核分裂数の累計数
b.異常核形態は平滑な核の輪郭や円形/楕円形核からの逸脱（例えば間隙、角ばった形態、核膜のしわ、アメーバ様形態）の程度を指し、腫瘍内で最も分化傾向が低い箇所且つ/又は浸潤性が高い箇所の高倍率（対物レンズ40-60x）で検討する。視野中に見られた異常核形態は、その視野の核の総数に対する割合（%）で表す。
　

腫瘍の組織グレード
MMEEはA+B+Cの合計のポイント、REEはA+C+D+Eの合計のポイント

トータルのポイント	グレード（悪性度）
3-5	I （低グレード、高分化型）
6-7	II （中グレード、中分化型）
8-9 or 8-10 (REE)	III （高グレード、低分化型）

表2. 新しい評価法　（Novel grading system）
　
評価の基準

組織学的特徴a	スコア
A. リンパ管侵襲 　　（Lymphovascular invasion）	0	なし
	1	あり
B. 核形態（Nuclear form）b	0	≦5% が異常
	1	＞5% が異常
C. 核分裂指数（10視野）c 　　　（Mitoses per 10 HPF）	0	≦62個/高倍率10視野
	1	＞62個/高倍率10視野

a.それぞれの組織学的な特徴を検討し、合計する。
b.表1の核形態と同様に検討する。平滑な核の輪郭や円形/楕円形核からの逸脱の割合。
c.表1の核分裂指数と同様に評価する。10の連続した視野（1視野は0.53mm, 対物レンズ40x）の核分裂数の累計数。
　
腫瘍の組織グレード

トータルのスコア	グレード（悪性度）
0	I （低グレード、高分化型）
1	II （中グレード、中分化型）
2-3	III （高グレード、低分化型）

核形態（Nuclear form）の評価では、平滑な核膜を持つ円形/楕円形核（赤矢印）から逸脱した核（黒矢印）を異常核形態と評価しています。
このMillsらの研究では、各評価法で評価した場合の生存中央値およびKaplan-Meierの生存曲線を以下の様に報告しています。
　
グレードI   MMEE: 27ヶ月、REE: 29ヶ月、novel grading system: 31ヶ月
グレードII  MMEE: 14ヶ月、REE: 12ヶ月、novel grading system: 14ヶ月
グレードIII  MMEE: 13ヶ月、REE: 5ヶ月、novel grading system: 8ヶ月

新しい評価法による組織グレードと全生存期間の生存曲線
（Millsらの報告2）より抜粋）